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Daudi-LUC
Daudi-LUC(人Burkitt's淋巴瘤细胞)
产品基本信息
细胞名称:Daudi-LUC(人Burkitt's淋巴瘤细胞)
种属来源:人
组织来源:外周血;B淋巴母细胞;Burkitt's淋巴瘤
细胞形态:淋巴母细胞样
生长特性:悬浮生长
培养基: RPMI-1640+10�S+1%双抗
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:4,每周 3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
注:该细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.2ug/ml浓度puro维持。加药需在细胞状态良好情况下。
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,然后进行细胞计数。
b、根据细胞数量对应加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。