【概述】
孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体,又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿,其既是杀真菌剂,又是染料,易溶于水,溶液呈蓝绿色。长期以来,渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等,而且为了使鳞受损的鱼延长生命,在运输过程中和存放池内,也常使用孔雀石绿。科研结果表明,孔雀石绿在鱼内残留时间太长,且其具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用,鉴于此,许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。
【用途】
本试纸卡为定性检测,可用于检测鱼、虾、以及鱼池或者鱼缸水样中的孔雀石绿残留。适于现场监控和大量样本筛查。
【检测原理】
孔雀石绿**检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,当试纸条插入检测样品溶液后,样品溶液中的孔雀石绿与金标抗体相结合,进而封闭金标抗体上孔雀石绿的抗原结合点,阻止金标抗体与纤维素膜上孔雀石绿蛋白偶联物结合,使T线颜色无变化;反之,如样品溶液中没有孔雀石绿,则不能阻止金标抗体与纤维素膜上的孔雀石绿蛋白偶联物结合,从而T线显红褐色。
【技术指标】
孔雀石绿**检测试纸条技术指标为水样2ppb组织2ppb。
【样品处理】
1. 取一定量的去脂肪组织样本,用剪刀剪碎;
2. 称取 2 克 匀质样本于 15 毫升离心管中;
3.用提取剂 1 专用滴管移取 1 毫升提取剂 1 加入到离心 管中,振荡 30 秒钟;将提取剂 2 加入到离心管中,振 荡 30 秒钟,将提取剂 3 加入到离心管中,剧烈振荡 2 分钟;
4. 室温下 4000 转/分钟,离心 5 分钟;
5. 取 3 毫升上清液于新的 5 毫升离心管中,用刻度滴管移取 2 毫升净化剂加入到离心管中,振荡 1 分钟,室温下 4000 转/分钟,离心 1 分钟,弃去上清;
6. 用移液滴管取 2.毫升下层于 5 毫升离心管中,用刻度 滴管移取 1 毫升清洁剂加入到离心管中,振荡 1 分 钟,室温下 4000 转/分钟,离心 1 分钟;
7.弃去上层液体,用移液滴管取 1 毫升下层液体于 5ml离心管中,60℃下空气吹干;
8. 向吹干的离心管中加入 0.3mL 复溶液,冲洗溶解试管内壁上残留物,吸取 100μl 溶液,待检。
【结果判断】
1.阴性(-):T 线显色(检测线,靠近加样孔一端) 比C 线(对照线)深或一样深,表示样品中待检药物浓度低于检测限或不含待检药物。
2. 阳性(+): T 线显色比 C 线浅,或 T 线无显色,表示样品中待检药物浓度高于检测限,T 线显色比 C线越浅,表示样品中待检药物浓度越高。
3.无效:未出现 C 线,可能是操作不当或试剂板已失 效。应再次阅读说明书,并用新的试剂板重新测试。
【存储条件和有效期】
1、试纸卡应于4~30℃密封、干燥、避光存放;
2、有效期为12个月。
在进行测试前先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和待检样本溶液恢复至室温(20℃~30℃)。
1.从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面, 如上图右侧所示(打开后请立即使用);
2.吸取待检样品溶液 100 微升于金标微孔中,用小滴管 吹打完全溶解孔内红色物质,等待反应 5 分钟;
3.吸取孔内所有溶液滴加到加样孔(见上图)中,加样后开始计时;
4. 结果应在 8-10 分钟读取,其他时间判读无效。