★ BioMag -Oligo(dT)包被磁珠
一、产品简介
Oligo(dT)磁珠是百迈格生物开发的一款用于杂交提取mRNA超顺磁单分散的磁珠，其表面共价偶联了寡聚dT序列，利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之间的碱基配对，可以从真核总RNA或者细胞、动植物组织中**分离高纯度完整mRNA。所分离的mRNA可以直接用于分子生物学中的大多数下游应用：RT-PCR、固相cDNA文库构建、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护分析、引物延伸、点杂交和槽杂交、体外扩增实验、RACE、消减杂交。Northern分析、基因克隆和基因表达分析。由于低聚物dT与磁珠表面共价结合特性，因此Bio Mag Beads oligo(DT)可以重复使用（原则上不建议回收反复利用，以避免交叉污染和影响下游实验）。
二、产品描述：
|
配体 |
Oligo(dT) |
|
磁珠表层材料 |
超顺磁亲水高分子磁珠 |
|
包装 |
2ml、10ml |
|
粒径大小 |
1μm |
|
浓度 |
5mg/ml |
|
结合量 |
≈10μg的mRNA/10mg磁珠 |
|
货号 |
BMDT1000-1ml、BMDT1000-5ml |
|
建议pH使用范围 |
1-9 |
|
沉降系数 |
2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s |
|
磁珠保存液 |
10mM PBS, 0.09%sodium azide，pH=7.4。 |
|
保存 |
4℃，禁止冷冻，使用前请充分混匀 |
|
批号 |
Lot: |
|
保存期 |
2-8℃保存，保质期三年，请于 年 月 日前使用。 |
注意事项
1.所有buffer在使用前要预冷到2-8℃。
2.要保证磁珠分散在溶液中，严禁磁珠干燥，会影响磁珠的分散和结合能力。
3.磁吸附后移除上清的步骤，必须完全移除掉所有上清。
4.我们建议提取到的mRNA立即用于RT-PCR。如果需要保存，建议洗脱液中添加RNase抑制剂，将mRNA从磁珠上洗脱下来并且冻存
5.避免污染，在操作过程中请佩戴一次性手套，避免接触其他污染物，并且建议多次更换手套，所有用于mRNA提取的buffer和耗材都应该是无核糖核酸酶的。
三、缓冲液配制
|
Binding Buffer |
20 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1.0 M LiCl, 2 mM EDTA. |
|
Lysis/Binding Buffer |
100 mM Tris-HCl, pH 7.5, 500 mM LiCl, 10 mM EDTA, 1% LiDS, 5 mM dithiothreitol (DTT)，如果发现沉淀，加热并且摇动溶解至澄清。 |
|
Washing Buffer A |
10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA, 0.1% LiDS. |
|
Washing Buffer B |
10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA 10 mM Tris-HCl, pH 7.5. |
注：如果提取后的mRNA不马上使用，请在洗脱液中添加RNase抑制剂，冷冻保存。
四、操作步骤
具体操作步骤见说明书
