人叉头框蛋白03(Human FoxO3) ELISA Kit厂家代测
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人叉头框蛋白03(Human FoxO3) ELISA Kit厂家代测根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法. ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少.ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有**，定性或者定量甚至定位的特点.. 双抗体夹心法，其基本原理是将一定量的包被抗体以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入无关蛋白载体封闭未结合位点，然后加入待检标本，通过加入检测抗体，酶标记第二抗体后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关. 该方法的适用条件是：含有多个抗原表位的大分子物质.因为这种检测方法需要两种抗体，所以就涉及抗体配对的问题.一般而言，常用的抗体配对方法有一下几种：包被抗体为单抗，检测抗体为多抗；包被抗体为单抗，检测抗体为单抗，但这两种单抗针对的抗原表位不同；包被抗体为多抗，检测抗体为多抗，这两种多抗一般是来源于不同的宿主.
标本因素对ELISA测定的影响,血清是**常用的ELISA标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源 性物质和外源性物质两种： 1． 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果.常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异 性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等. （1）类风湿因子 人血清中IgM、IgG型类风湿因子（RF）可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳性. 解决该情况的办法是：①用F(ab)2替代完整的IgG；②标本用联有热变性（63℃，10 min）IgG的固相吸附剂处理（将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效）；③检测抗原时，可以用2-巯基乙醇等加入到标本 稀释液中，使RF降解..
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显色弱灵敏度低 在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中孔的显色比较浅，即只有微弱的信号呈现. 出现该现象的可能原因： 产品过有效期，试剂没有按规定进行适当的保存. 试剂，标准品或者样品在使用前没有平衡到室温. 少加了试剂的量或者加入试剂的稀释比例不当. 洗板或者加样过程中，酶标物受污染失活. 孵育时间和孵育温度未达到实验要求. 洗涤液稀释倍数不符合要求，洗板次数过多，洗板冲击力过大，洗板浸泡时间过长. 底物溶液TMB显色时间太短. .
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