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人玻连蛋白/体外粘连蛋白(Human VN/CD51+CD61)ELISA Kit厂家代测
发布时间:2017-03-18 23:02:15 编号:SC-16-3908261
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人玻连蛋白/体外粘连蛋白(Human VN/CD51+CD61)ELISA Kit厂家代测

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包被的条件 包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定.抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的.通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过 ye,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果.包被的**适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定.一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml.人玻连蛋白/体外粘连蛋白(Human VN/CD51+CD61)ELISA Kit厂家代测欢迎致电北京方程生物获取相关资料。

 

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人玻连蛋白/体外粘连蛋白(Human VN/CD51+CD61)ELISA Kit厂家代测用于稀释高浓度的结合物以配成工作液.为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上,在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%牛血清白蛋白),通过竞争以抑制结合物的吸附.一般还加入具有抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20,0.05%的浓度较为适宜.在间接测定抗体时,血清标本需稀释后进行测定,也可应用这种稀释液..

封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件.并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高.一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤**,不经封闭也可得到满意的结果.特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用.但在间接法测定中,封闭一般是不可少的(见2.2.2).包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月.

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. 在ELISA实验中应注意以下问题: 1.在实验前应该按相关要求将实验试剂平衡至室温. 2.包被抗体和检测抗体应该是有高活性的且都针对同一抗原. 3.试剂保存:蛋白抗体类试剂保存于-20摄氏度,显色液洗涤液保存于2-8摄氏度. 4.各试剂在使用前应充分混匀,以保证试剂的均一性和准确性. 5.严格控制反应温度和反应试剂. 6.洗板次数,洗板液的量,洗板液浸泡时间的长短,洗板的力度都是应该注意的问题. 7.相关浓缩液应按要求稀释到相应比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之间. 8.在终止反应时尽量避免微孔中存有气泡. 9.终止反应完成后应该在2min内完成酶标仪读数..

 

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