人维生素D(Human VD)ELISA Kit厂家代测
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为避免上述干扰作用,解决的办法**是血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血 管中加入适当的促凝剂. (5)标本管中添加物质的影响 抗凝剂(如肝素,EDTA)、酶抑制剂(如NaN3可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性)及**分离血清的分离胶等均对E LISA测定有一定干扰作用. 综上所述,对临床检验 ELISA测定中出现的假阳性或假阴性结果,在考虑试剂因素和操作因素之外,更多的应从标本因素方面进行分 析,并应采取相应措施排除干扰作用,从而为临床提供正确可靠的检测结果..人维生素D(Human VD)ELISA Kit厂家代测欢迎致电北京方程生物获取相关资料。
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人维生素D(Human VD)ELISA Kit厂家代测洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败.ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的.通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质.聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来.可以说在ELISA操作中,洗涤是**主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎
试剂盒的储存及有效期 1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存.请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃, 2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿
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包被的方式 将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating).换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程.蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力.这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响.载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面. 包被用抗体 包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性,可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液.如免疫用抗原中含有杂质(即便是极微量的),在抗血清中将出现杂抗体,必须除去(可用吸收法)后才能用于ELISA,以保证试验的特异性.抗血清不能直接用于包被,应先提取IgG,通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法.一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被,高度纯化的IgG性质不稳定.如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性,则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG.腹水中单抗的浓度较高,特异性亦较强,因此不需要作吸收和亲和层析处理,一般可将腹水作适当稀释后直接包被,必要时也可用纯化的IgG.应用单抗包被时应注意,一种单抗仅针对一种抗原决定簇,在某些情况下,用多种单抗混合包被,可取得更好的效果.
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