人尿游离皮质醇(Human UFC) ELISA Kit厂家代测
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人尿游离皮质醇(Human UFC) ELISA Kit厂家代测标本的采取和保存 可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份.有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）.大部分ELISA检测均以血清为标本.血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清.制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血 收缩后即可取得.除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本.在ELISA中血浆和血清可同等应用.血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色.
3.2.1酶 用于ELISA的酶应符合以下要求：纯度高，催化反应的转化率高，专一性强，性质稳定，来源丰富，价格不贵，制备成酶结合物后仍继续保留它的活性部分和催化能力.**在受检标本中不存在相同的酶.另外，它的相应底物易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定等. 在ELISA中，常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosohatase, AP).在少数商品ELISA试剂中，应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶和脲酶等.国产ELISA试剂一般都用HRP制备结合物.HRP是一种糖蛋白，含糖量约为18%，分子量为44000，是一种复合酶，由主酶（酶蛋白）和辅基（亚铁血红素）结合而成，是一种卟啉蛋白质.主酶无色糖蛋白在275nm波长处有**高吸收峰，辅基是深棕色的含铁卟啉环，在403nm波长处有**高吸收峰.HRP的纯度用RZ(Reinheit Zahl，德文，意为纯度数）表示，是403nm的吸光度与280nm吸光度之比，高纯度的HRP的RZ≥?.0. HRP除符合上述的ELISA中标记酶的要求外，更有价格低廉和性质较稳定的特点.值得注意的是，在选用酶制剂时，除其纯度RZ外，更应注意酶的活力.高纯度的酶如保存不当，活力也会降低.酶制剂的活力以所含的酶活力单位表示，可用对底物作用后生成产物量的测定进行试验.. 国外很多ELISA试剂采用碱性磷酸酶（AP）作为标记酶.常用的AP有两个来源，分别从大肠杆菌和小牛肠膜中提取.不同来源的酶生化特性特性略不相同，从大肠杆菌中提取的AP分子量为80000，酶作用的**适合pH为8.0；用小牛肠膜中提取的AP分子量为100000，**适pH为9.6.在ELISA中，AP系统的敏感度一般高于HRP系统，空白值也较低，但AP价格昂贵，制备结合物所得率也较HRP低.
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温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等.37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度.在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰.为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃进行，但不宜采用更高的温度.抗原抗体反应4℃更为**，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过 ye，以形成**多的沉淀.但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用
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