ELISA实验小窍门:影响ELISA中非特异性显色的原因有很多,比如试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物,操作过程中的问题。现在就这原因作一简要分析,以便可以通过以上措施把非特异显色降至**限度,从而提高检测的特异性,并得到更准确、可靠的实验结果。
大鼠C4a ELISA Kit Rat Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit
elisa 小知识:
辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的**吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的**吸收峰是275nm,所以酶的浓度和纯度计算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶浓度以 mg/ml 计算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm纯度RZ(Reinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右,**高可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。
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