elisa 小知识：

辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白，每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的**吸收峰是403nm，HRP酶蛋白的**吸收峰是275nm，所以酶的浓度和纯度计算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)＝25，式中1％指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g，即10mg/ml，所以，酶浓度以 mg/ml 计算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm纯度RZ(Ｒeinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右，**高可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。

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Elisa试剂盒使用注意事项：

1. Elisa试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，**使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔OD值的)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请**后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5．严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

6．本试剂不同批号组分不得混用。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．底物请避光保存。

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