1.**提取:15分钟**基因组DNA提取,无需组织裂解试剂,实验过程无需调pH值、离心;
2.**分型扩增:45分钟**高效扩增;
3.扩增试剂:分热启动型和非热启动型两种,含有染料,扩增后可直接电泳;
4.减少繁琐步骤,降低污染风险;
5.高通量操作:可在PCR仪上批量处理样本;
6.扩增产物末端加A,且可进行下游酶切、测序等;
7.节约成本,提取+扩增,合计低于6元。
小鼠核因子κB受体活化因子配基试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
4.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
5.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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