品牌:艾恩斯
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信息标签:人副流感病毒IgM抗体(HPIVs IgM)定性检测试剂盒(ELISA),供应,化工,实验室用品,试剂盒
通用名称:人副流感病毒IgM抗体(HPIVs IgM)定性检测试剂盒(ELISA)
英文名称:Human HPIVs IgM ELISA KIT
【包装规格】
48人份/盒,96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中是否含有人副流感病毒IgM抗体。
【检验原理】
本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被人副流感病毒IgM抗体抗原(固相抗原,货号:INS1020202C)的微孔酶标板中,加入人副流感病毒IgM抗体阴阳性性对照(货号:INS1020202J)和待测样本,温育洗涤,再加入另一株HRP标记的抗人副流感病毒IgM抗体抗体(酶标抗体,货号:INS1020202E),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,**终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中人副流感病毒IgM抗体的浓度正相关,通过计算公式判断样品阴阳性。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前,所有的组分都要至少复温2h,确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。
3、底物:底物液A和B,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后15分钟内使用。
操作程序
1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置阴阳性对照孔、样本孔,阴阳性对照孔各加对照品50μL,样本孔加样本50μL。
5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
8、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
10、所有孔加入终止液50μL,在酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。
【检验结果的解释】
检测完成后,以阴性对照的OD+0.25,做为阈值,样本OD值大于阈值,为阳性;样本OD值低于阈值为阴性。