CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)系统是继ZNF和TALENS技术之后的第三代基因编辑技术，被广泛应用于细胞水平和个体水平基因编辑细胞系和模式动物的建立。

       CRISPR/Cas9系统利用sgRNA/Cas9复合体识别并在DNA特异位点造成双链断裂，利用细胞自身修复机制或者与外源DNA同源重组实现基因敲、敲入和序列突变。
       金开瑞应用CRISPR/Cas9技术，为您提供细胞系基因敲除/敲入/突变等服务，全方位满足您对基因功能研究方面的各项需求。

技术优势
操作简单，靶向**性更高；
可实现对多个靶基因位点或多个靶基因的同时敲除/敲入/突变；
适用于人、大鼠、小鼠以及部分其他哺乳动物等各种细胞系的靶向敲除/敲入/突变。

服务内容
基因敲除细胞系建立；
基因敲入细胞系建立；
基因定点突变细胞系建立。

一、CRISPR/Cas9系统基因编辑细胞
服务流程
接收订单—基因评估—sgRNA设计—表达sgRNA和Cas9蛋白的慢病毒包装—感染细胞—细胞药物筛选—混合细胞PCR检测—细胞分孔，挑取单克隆—单克隆扩大培养后PCR测序检测—结果交付

客户提供
目的基因序列信息（Gen Bank Accession number、Gene ID、关键词）；
细胞类型及名称（也可选择由金开瑞代购），细胞培养条件。

**终交付
sgRNA序列；
基因敲除/敲入/突变单克隆细胞系；
sgRNA-Cas9基因敲除/敲入/突变质粒鉴定测序结果；
结题报告（包括实验步骤、测序结果及相关原始图片）。

案例展示
Cas9技术敲除细胞系构建案例：
Step 1: sgRNA设计


Step 2: 细胞抗药性筛选预实验


Step 3:转染效率测试：明场和绿色荧光


Step 4: 药物筛选、单克隆培养及单克隆细胞系靶点检测


二、CRISPR/Cas9基因编辑模式动物
       利用CRISPR/Cas9技术使动物基因组发生可遗传变异，现已广泛用于基因编辑动物建立。将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA或者体外翻译的Cas9蛋白对小鼠/大鼠受精卵单细胞进行胞质或者原核显微注射后，得到基因敲除、敲入或者定点突变的编辑鼠。 
       
        金开瑞应用CRISPR/Cas9技术，为您提供大小鼠基因敲除/敲入/突变等服务，全方位满足您对基因功能研究方面的各项需求。

技术优势
专业团队设计基因编辑方案；
配套完整、技术成熟、**、成功率高。

应用方向
全身性敲除或条件性敲除大小鼠模型；
敲入性基因编辑大小鼠模型； 
① 敲入GFP/RFP/LacZ等序列，标记内源基因 
② 与基因组序列替换，引入点突变
成体鼠导入CRISPR-Cas9病毒（腺病毒或者腺相关病毒）进行基因编辑。

服务流程
接收订单—基因评估—sgRNA-Cas9载体构建—sgRNA-Cas9细胞活性检测—体外转录—受精卵显微注射—F0代基因型鉴定—F1代基因型鉴定—结果交付

服务及交付内容


案例展示
Cas9敲除小鼠构建案例：
Step 1：根据基因信息，设计sgRNA；
Step 2：sgRNA体外转录；

Step 3：受精卵显微注射，假孕鼠回输。鉴定Founder小鼠；

Step 4: F1杂合子鉴定，交付

模型鼠其他相关业务
国外公司、实验室模型鼠引进业务，包括活鼠引进，精子冻存或者胚胎冻存形式的引进；
小鼠成瘤；
小鼠/大鼠活体成像。


       金开瑞生物拥有分子生物学、蛋白质组学、蛋白表达、抗体制备、综合项目、检测分析，病毒包装，整体方案研究等八大服务平台，专业为生物技术领域的科研人员提供高质量的技术服务。如果您有兴趣可以联系我qq：3013422302    电话：13720334759