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人胶原蛋白Ⅱ进口ELISA试剂盒报价
发布时间:2017-03-14 10:38:33  点击:0

人胶原蛋白Ⅱ进口ELISA试剂盒报价

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洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下: (1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体.吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定).在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间. 微量滴定板多采用浸泡式洗涤法.洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液.聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体.洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度. (2)流水冲洗式 流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水.洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可.浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速.已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤.洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳人胶原蛋白Ⅱ进口ELISA试剂盒报价欢迎致电北京方程生物获取相关资料。

 

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人胶原蛋白Ⅱ进口ELISA试剂盒报价保温 在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后.抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当. ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生.以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触.这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点.在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此.这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育

标本因素对ELISA测定的影响,血清是最常用的ELISA标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源 性物质和外源性物质两种: 1. 内源性物质 有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果.常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异 性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等. (1)类风湿因子 人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性. 解决该情况的办法是:①用F(ab)2替代完整的IgG;②标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效);③检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本 稀释液中,使RF降解..

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注意: 试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕,产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的. 血清: 将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4oC 过夜,然后 1000×g 离心 20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融.

 

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