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人水闸蛋白14进口ELISA试剂盒报价
发布时间:2017-03-13 21:18:22  点击:0

人水闸蛋白14进口ELISA试剂盒报价

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人水闸蛋白14进口ELISA试剂盒报价用于稀释高浓度的结合物以配成工作液.为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上,在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%牛血清白蛋白),通过竞争以抑制结合物的吸附.一般还加入具有抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20,0.05%的浓度较为适宜.在间接测定抗体时,血清标本需稀释后进行测定,也可应用这种稀释液..

可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物等均可作标本,以测定其中某种抗体或抗原成份,有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物),大部分ELISA检测均以血清为标本,血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清,制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得,除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本,在ELISA中血浆和血清可同等应用,血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色.

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洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下: (1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体.吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定).在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间. 微量滴定板多采用浸泡式洗涤法.洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液.聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体.洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度. (2)流水冲洗式 流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水.洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可.浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速.已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤.洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳

 

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