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人胆囊收缩素进口ELISA试剂盒报价
发布时间:2017-03-13 21:04:06  点击:0

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包被的方式 将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating).换言之,包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程.蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用力.这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响.载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面. 包被用抗体 包被固相载体的抗体应具有高亲和力和高特异性,可取材于抗血清或含单克隆抗体的腹水或培养液.如免疫用抗原中含有杂质(即便是极微量的),在抗血清中将出现杂抗体,必须除去(可用吸收法)后才能用于ELISA,以保证试验的特异性.抗血清不能直接用于包被,应先提取IgG,通常采用硫酸铵盐析和Sephadex凝胶过滤法.一般经硫酸铵盐析粗提的IgG已可用于包被,高度纯化的IgG性质不稳定.如需用高亲和力的抗体包被以提高试验的敏感性,则可采用亲和层析法以除去抗血清中含量较多的非特异性IgG.腹水中单抗的浓度较高,特异性亦较强,因此不需要作吸收和亲和层析处理,一般可将腹水作适当稀释后直接包被,必要时也可用纯化的IgG.应用单抗包被时应注意,一种单抗仅针对一种抗原决定簇,在某些情况下,用多种单抗混合包被,可取得更好的效果.人胆囊收缩素进口ELISA试剂盒报价欢迎致电北京方程生物获取相关资料。

 

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人胆囊收缩素进口ELISA试剂盒报价试剂盒操作注意事项: 1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温.稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存 2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质 3.不用的其它试剂应包装好或盖好,不同批号的试剂不要混用,保质前使用,使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 4.使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品, 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水 5.底物A应挥发,避免长时间打开盖子,底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下,避免用手接触,有毒,实验完成后应立即读取OD值 6.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样 7.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作.

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样本收集注意事项:(1)要注意避免出现严重溶血,血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色 (2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰 (3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存.样本的长时间保存,应在-70℃以下 (4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融,标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果,此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可.

 

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